[세균] 세균 배양 實驗 - LB배지 만들기
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작성일 19-10-07 06:20
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1. 화염멸균 ( Sterilization by open fire ) - 미생물의 접종 및 도말할 때 사용되는 백금이와 유리 도말기 또는 시험관이나 플라스크의 입구부분을 불꽃에 직접 접촉하여 안전한 물건에 묻어 있는 미생물들을 불꽃으로 데워 죽이는 방법
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[세균] 세균 배양 實驗 - LB배지 만들기
total 1,000㎖ 기준
g
세균 ,배양 ,실험,LB,배지
750㎖ to melt
2. 건열멸균 ( Sterilization by dry heat ) - 유리기구 등과 같이 고온에 안전한 물체를 멸균할 때 사용하는 방법으로, 대상물체를 오븐에 넣고 170℃에서 90분간 넣어 두는 방법이다.(pre-mixture)
▲ 멸균
레포트 > 자연과학계열
시료(tryptone, Yeast extract......)의 무게 때문에 total volume은 1ℓ가 넘을 것이다. autoclave는 밀폐된 상태에서 1.2kg/cm2(15 lb/in2)의 증기압(120～121℃)에서 20분 정도 처리함으로써 멸균하는 기계이다. 5. 자외선멸균 ( Sterilizatioin by UV irradiation ) - 200～380nm의 파장을 갖는 빛을 자외선이라 하는데, 그 중 살균력을 갖는 파장은 254nm 부근의 빛이다. 왜냐하면 멸균을 위한 처리 후에 대상물질로부터 쉽게 제거 되어야하기 때문이다. 주로 사용되는 것은, 산화에틸렌( ethylene oxide )으로 기화점이 10.8℃이다. 이 방법은 짧은 시간에 단 1회 멸균으로 포자까지 사멸시킬 수 있어 배양배지 및 여러 용액이나 實驗기구등의 멸균등에도 널리 사용되고 있다아
4. 여과멸균 ( Sterilization by filtration ) - 열에 약하여 열을 가했을 때 파괴되거나 변질되는 용액들의 멸균에 많이 사용되며 pore size가 0.2㎛정도 되는 여과막을 통과시킴으로써 용액안의 미생물을 분리제거하는 방법이다. 세포배양을 위해 사용되는 clean bench에서 사용됨.
6. 화학적멸균 ( Sterilization by chemical treatment ) - 배양배지에 사용되는 구성成分들이 열에 약한 경우가 종종 있는데, 이런 경우 화학약품을 사용하여 멸균한다.
5. pre-mixture(tryptone, yeast extract, NaCl)를 삼각플라스크에 넣어, agar와 Mix
15g
4. 위 계산대로, 총 부피의 만큼인 ㎖ D.W를 비이커에 넣어 시료를 녹인다.
10g
Material
순서
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2. 위 계산된 조성대로 시약( agar를 제외하고 )을 비이커에 넣는다. 4. 여과멸균 ( Sterilization by filtration ) - 열에 약하여 열을 가했을 때 파괴되거나 변질되는 용액들의 멸균에 많이 사용되며 pore size가 0.2㎛정도 되는 여과막을 통과시킴으로써 용액안의 미생물을 분리제거하는 방법이다.
▲ 멸균 - 멸균이란? 대상 물체에 존재하는 모든 생명체들을 완전히 죽이는 조작을 말한다. autoclave는 밀폐된 상태에서 1.2kg/cm2(15 lb/in2)의 증기압(120～121℃)에서 20분 정도 처리함으로써 멸균하는 기계이다. - 멸균방법 1. 화염멸균 ( Sterilization by open fire ) - 미생물의 접종 및 도말할 때 사용되는 백금이와 유리 도말기 또는 시험관이나 플라스크의 입구부분을 불꽃에 직접 접촉하여 안전한 물건에 묻어 있는 미생물들을 불꽃으로 데워 죽이는 방법 2. 건열멸균 ( Sterilization by dry heat ) - 유리기구 등과 같이 고온에 안전한 물체를 멸균할 때 사용하는 방법으로, 대상물체를 오븐에 넣고 170℃에서 90분간 넣어 두는 방법이다.
total ㎖ 기준
3. 습열멸균 ( Sterilization by moist heat ) - 배양배지 같은 용액들을 멸균하는데 사용되며 보통 autoclave를 사용한다.
5. 자외선멸균 ( Sterilizatioin by UV irradiation ) - 200～380nm의 파장을 갖는 빛을 자외선이라 하는데, 그 중 살균력을 갖는 파장은 254nm 부근의 빛이다.
g
NaCl
D.W(distilled water)
[ (예) 만약, 우리가 total 1ℓ의 배지를 만들고자 할 때, 총 부피와 같은 1ℓ의 D.W로 녹인다면,
Tryptone
10g
1. 1개의 LB plate는 15㎖～20㎖ 필요하므로, 각 조는 total volume(조교의 지도)에 맞춰 시료양을 계산한다. [ 주의! agar를 처음에 넣으면 굳기 처음 하므로, 가장 나중에 넣어야 함 ]
㎖ to melt
설명
Yeast extract
6. 메스실린더에서 정확히 최종부피를 D.W로 맞춘다. 3. 습열멸균 ( Sterilization by moist heat ) - 배양배지 같은 용액들을 멸균하는데 사용되며 보통 autoclave를 사용한다. 이 화학약품은 멸균할 수 있는 독성과 휘발성의 성질을 가지고 있다. 그러나 virus같은 크기가 매우 작은 것들은 여과막을 통과할 수 있으므로, virus를 가질 수 있다는 가능성에 유의해야 한다. (pre-mixture)
- 멸균방법
3. agar는 삼각플라스크에 따로 넣는다. 그러나 virus같은 크기가 매우 작은 것들은 여과막을 통과할 수 있으므로, virus를 가질 수 있다는 가능성에 유의해야 한다. 이 방법은 짧은 시간에 단 1회 멸균으로 포자까지 사멸시킬 수 있어 배양배지 및 여러 용액이나 실험기구등의 멸균등에도 널리 사용되고 있다.
다. 이 화학약품은 멸균할 수 있는 독성과 휘발성의 성질을 가지고 있다아 왜냐하면 멸균을 위한 처리 후에 대상물질로부터 쉽게 제거 되어야하기 때문이다. ]
+ ( fill up to total 1,000㎖ )
g
메스실린더, 삼각플라스크, 비이커, 교반기, magnetic bar, 전자저울, 70% 에탄올, 시약수저, 증류수, petridish, autoclave tape
5g
LB 배지
Method
Agar
- 멸균이란? 대상 물체에 존재하는 모든 생명체들을 완전히 죽이는 조작을 말한다. 주로 사용되는 것은, 산화에틸렌( ethylene oxide )으로 기화점이 10.8℃이다. 세포배양을 위해 사용되는 clean bench에서 사용됨. 6. 화학적멸균 ( Sterilization by chemical treatment ) - 배양배지에 사용되는 구성성분들이 열에 약한 경우가 종종 있는데, 이런 경우 화학약품을 사용하여 멸균한다.
